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ATCC细胞系的细胞培养小技巧

原载自:[技术资料频道]  2018/4/24  浏览次数:83

  ATCC细胞系液体培养基的保存要冷藏,因为液体培养基经冷冻后再经溶化时,其溶液的pH值会发生改变,溶液往往变碱,某些成分溶解也会受到影响对细胞生长不利。故液体培养基一定要存放在冷藏箱中,通常液体培养基在冷藏条件下可存放6个月 ~ 一年。
  ATCC细胞系的细胞培养小技巧:
  1. 买细胞要去靠谱的地方买,比如 ATCC 或者斯信生物。一般上面会有针对细胞的介绍,这样培养之前可以了解细胞正常生长的状态图、传代、培养基的类型等。
  2. 不管是买的细胞,还是别人惠赠的细胞,刚拿到手赶紧的做两件事:检测是否有支原体污染;迅速扩增冻存,冻存细胞复苏后第二天zui 好更换一次培养基。
  3. 发现细胞有污染迅速处理掉,特别是当你养了很多种细胞时。污染、污染很容易发现,支原体污染的话,细胞会长的慢,可以买个支原体检测的试剂盒定期检测一下。
  4. 不同细胞生长周期不同。有的生长很快,比如说 MDA-MB-231,传代的时候取离心悬液的十分之一就已经足够了。有的又是特别慢,比如 BT474,传代是一分二,复苏起始的时候两周多才能长满。这就需要要在培养细胞的过程中多多摸索。
  5. 对于娇弱的细胞,就得细心呵护。胰酶消化不能过久,吹得时候要轻柔,离心时候也要注意转速和时间。每天都要去看一下细胞,肉眼观察培养基状况、显微镜下观察细胞生长状况。记住,是每天。
  ATCC细胞系注意事项:
  1)操作前要洗手,进入超净台后手要用75%酒精或0.2%新洁尔灭擦试。试剂等瓶口也要擦试。
  2)点燃酒精灯,操作在火焰附近进行,耐热物品要经常在火焰上烧灼,金属器械烧灼时间不能太长,以免退火,并冷却后才能夹取组织,吸取过营养液的用具不能再烧灼,以免烧焦形成碳膜。
  3)操作动作要准确敏捷,但又不能太快,以防空气流动,增加污染机会。
  4)不能用手触已消毒器皿的工作部分,工作台面上用品要布局合理。
  5)瓶子开口后要尽量保持45℃斜位。
  6)吸溶液的吸管等不能混用。

 

 

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