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我们来了解下ATCC细胞的活化方式吧

原载自:[行情动态]  2019-04-03  浏览次数:209

   我们来了解下ATCC细胞的活化方式吧
  ATCC细胞在培养瓶长成致密单层后,已基本上饱和,为使细胞能继续生长,同时也将细胞数量扩大,就必须进行传代(再培养)。
  传代培养也是一种将细胞种保存下去的方法。同时也是利用培养细胞进行各种实验的必经过程。悬浮型细胞直接分瓶就可以,而贴壁细胞需经消化后才能分瓶。
  ATCC细胞的细胞活化方式:
  1.冷冻细胞之活化原则为快速解冻,以避免冰晶重新结晶而对细胞造成伤害,导致细胞之死亡。
  2.细胞活化后,约需数日,或继代一至二代,其细胞生长或特性表现才会恢复正常(例如产生单株抗体或是其它蛋白质)。
  3.材料:37℃恒温水槽、新鲜培养基、无菌吸管/离心管/培养瓶、液氮或干冰容器。
  ATCC细胞的解冻:
  (1)操作人员应戴防护面罩及手套,防止冷冻管可能爆裂之伤害。
  (2)自液氮或干冰容器中取出冷冻管,检查盖子是否旋紧,由于热胀冷缩过程,此时盖子易松掉。
  (3)将新鲜培养基置于37℃水槽中回温,回温后喷以70%酒精并擦拭之,移入无菌操作台内。
  (4)取出冷冻管,立即放入37℃水槽中快速解冻,轻摇冷冻管使其在1分钟内全部融化,以70%酒精擦拭保存管外部,移入无菌操作台内。
  (5)取出解冻之细胞悬浮液,缓缓加入有培养基之培养容器内(稀释比例为1:10-1:15),混合均匀,放入CO2培养箱培养。取0.1ml解冻细胞悬浮液作存活测试。
  (6)解冻后是否立即去除冷冻保护剂,依细胞种类而异,一般而言,大都不需要立即去除冷冻保护剂。倘若要立即去除,则将解冻之细胞悬浮液加入含有5-10ml培养基之离心管内,离心1000rpm,5分钟,移去上清液,加入新鲜培养基,混合均匀,放入CO2培养箱培养。
  (7)若不需立即去除冷冻保存剂,则在解冻培养后隔日更换培养基。

 

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